Reinigingsvalidatie van bereidingsvaten

A
Extr ct
Reinigingsvalidatie van bereidingsvaten:
een praktijkvoorbeeld
L.A.A. van Gendt - de Jong, H.T. Wolters, E.J.H. Olyslager,
J. Wieferink, A. Moret, L. van Tent, H. Wilkes, R.M. Posthuma
Ziekenhuisapotheek Gelre Ziekenhuizen Apeldoorn/Zutphen
Samenvatting
Reinigingsvalidatie is een integraal deel van de GMP in de
farmaceutische industrie en bereidings-/ziekenhuisapotheek.
Om de reiniging van de bereidingsvaten in onze ziekenhuisapotheek te valideren is bupivacaïne als “worst-case”
genomen en gemeten met behulp van een gevalideerde
LCMSMS-methode in de laatste spoelgang en/of na een
additionele spoelstap van 10L. Daarnaast zijn er ook TOCmetingen verricht en is de reiniging tevens beoordeeld op
fysische en microbiologische gronden.
De LCMSMS-methode voor bupivacaïne is gevalideerd met
natriumchloride als matrix. De monsters hoeven niet opgewerkt te worden, verdunning met WFI/0,1% mierenzuur
volstaat. De calibratiecurve is lineair over een bereik van
0,15 µg/l tot 1,5 µg/l. De juistheid, intra-dag en inter-dag
precisie zijn kleiner dan 5%, voor de LLOQ is dit kleiner
dan 15%. De recovery van bupivacaïne van RVS-vaten na
spoelen is 106%, wat het nemen van alleen spoelmonsters
rechtvaardigt. Het 50L vat is na reiniging schoon op basis
van zowel de TOC-waarden, de bupivacaïne concentraties
als fysische en microbiologische gronden. In het 400L vat
worden bupivacaïne concentraties teruggevonden met
behulp van LCMSMS boven de gestelde ACTION-level,
die echter in de patiënt niet zullen leiden tot toxiciteit. Ook
in het 400L vat voldoen de gevonden TOC-gehaltes, de
geleidbaarheid, het kiemgetal en de endotoxinen aan hun
gestelde limieten.
Lijst met gebruikte afkortingen
CIP
Cleaning-In-Place
ACN
Acetonitril
ESI
ElectroSpray Ionisation
FA
Formic Acid (mierenzuur)
GMP
Good Manufacturing Practice
LCMSMS
Liquid Chromatography Tandem Mass
Spectrometry
LLOQ
Lower Limit Of Quantification
MS
Mass Spectrometry
18
QC
Quality Control
SIP
Steam-In-Place
TOC
Total Organic Carbon
UPLC
Ultra Performance Liquid Chromatography
WFI
Water For Injection
Introductie
De bereidingsvaten (50L en 400L) waarvan de reinigingen
gevalideerd zijn, worden gebruikt voor de productie van
vloeibare geneesmiddelen die in de regel worden onderworpen aan een sterilisatieproces of kiemreducerende
behandeling in de eindverpakking. Het oppervlak van de
installatie dat in contact komt met het product bestaat voor
het overgrote deel uit roestvrij staal 316L met een oppervlakte ruwheid Ra < 0,8 µm. De te valideren reinigingsprocedure betreft een gedeeltelijk geautomatiseerde
“cleaning-in-place” (CIP) proces gevolgd door “steamin-place” (SIP), waarbij geen reinigingsmiddelen worden
toegepast. Bupivacaïne is gekozen als “worst-case”
voor beide vaten op basis van de toxiciteit en een reeds
bestaande analysemethode voor kwaliteitscontrole. Er
is gekozen voor het nemen van spoelmonsters omdat
alle bereide producten goed water oplosbaar zijn. Om de
reiniging van het vat te valideren zijn er monsters gemeten
met behulp van TOC en een gevalideerde LCMSMS
methode. Daarnaast zijn de vaten visueel geïnspecteerd
en zijn geleidbaarheid, kiemgetal en endotoxinen in de
monsters bepaald.
Experimenteel
Chemicaliën en apparatuur
Alle chemicaliën zijn analytisch zuiver. Ammoniumformiaat
en mierezuur zijn ingekocht bij Fluka (Buchs, Zwitzerland),
acetonitril bij Riedel de Haen (Honeywell, Seelze, Duitsland)
en bupivacaïne is verkregen bij BUFA/Spruyt Hillen
(IJsselstein, Nederland). Een stockoplossing van een 0,5
mg/ml bupivacaine is gemaakt in WFI en de standaarden
zijn verdund in WFI met 0,1% mierenzuur.
De reinigingsvalidatie monsters zijn gemeten op een Acquity
UPLC systeem en een Quattro Premier XE massa spectrometer met electrospray ionisatie van Waters (Milford, MA,
USA). Tabel 1 geeft een overzicht van de parameters van
zowel de UPLC als de massa spectrometer. In de MSmethode is als MRM overgang in de onderstaande tabel
A
Extr ct
alleen de overgang voor bupivacaïne meegenomen.
De methode is in eerste instantie opgezet als screeningsmethode en bevat daarom overgangen van in totaal 18
componenten, waaronder mepivacaïne. Het meten van de
TOC-gehaltes is uitbesteed aan Beun de Ronde (Analytik
Jena Multi N/C UVHS; Abcoude, Nederland) en de Isala
klinieken (Zwolle, Nederland). De geleidbaarheid is gemeten
op een 712 Conductometer van Metrohm (Herisau,
Zwitserland) en de endotoxinen op de Cambrex ELX 808
met WinKQCL software (Cambrex, NJ, USA).
Validatie van de analysemethode
De analysemethode is gevalideerd over een bereik van
0,15 tot 1,5 µg/l gemeten met vijf standaarden in drievoud.
QC monsters zijn gespiked met bupivacaïne op 20% (QC1), 50% (QC-2) en 80% (QC-3) van de calibratiecurve en
gemeten in 3-voud op 3 opeenvolgende dagen. Daarnaast
zijn het matrix effect, de stabiliteit en LLOQ van de methode
bepaald, zoals beschreven door Wieling e.a. [1]. Deze
methode is een afgeleide van de methode die gebruikt
wordt voor de kwaliteitscontrole, vandaar dat er over 3
dagen gemeten is in plaats van 5.
Bepaling van de recovery
Twee coupures van 10x10 cm RVS 316L (Ra < 0,4 µm) zijn
voor aanvang van de recovery bepaling gereinigd gedurende
5 min in 5% zwavelzuur, afgespoeld met WFI en daarna
gedroogd in een stoof bij 35°C. Een oppervlak van 81 cm2
is vervolgens besmet met 0,5 ml van een oplossing met
daarin 420 µg/l bupivacaïne. Beide coupures zijn gedroogd
in een oven bij 60°C en na afkoelen gespoeld met 220 ml
heet WFI. Deze monsters zijn vervolgens verdund naar een
eindconcentratie van 0,95 µg/l bupivacaïne en gemeten ten
opzichte van de spike oplossing op de LCMSMS.
Tabel 6 samenvatting van de ingestelde parameters van de LCMSMS methode
Chromatografische condities
Kolom
Kolom temperatuur
Mobiele fase
Flow rate
Injectievolume
MS condities
MS systeem
MS software:
Ionization mode:
Capillary voltage:
Desolvation
temperatuur:
Desolvation gas:
Source temperature:
MRM
Cone
Collision Energy
Retentie tijd (Rt)
Waters Acquity UPLC HSS C18 kolom 1,8 µm 2,1x150 mm
50°C
A: 5 mM ammoniumformiaat pH 3,0
B: 100% ACN + 0,1 % FA
Tijd (min) %A
%B
Gradient:
0,00
95,0
5,0
0,50
50,0
50,0
7,00
50,0
50,0
7,50
5,0
95,0
8,75
5,0
95,0
9,00
95,0
5,0
10,00
95,0
5,0
0,400 ml/min
5 µl
Waters Quattro Premier XE
MassLynx
ESI positief
1,2 kV
400°C
900 l/uur
140°C
289,26 > 140,2
37 V
26 V
4,4 min
289,26 > 84,1
37 V
40 V
19
Bepaling van spoelmonsters
A
Extr ct
Tijdens de reingingsvalidatie worden tegelijkertijd de uitvulleidingen en uitvul
reiniging. Een overzicht van de te reinigen apparatuur inclusief het monsteraf
Figuur 2. Monstername voor beide vaten vindt plaats bij de uitvulmachine voo
Dit uitvulpunt is tevens representatief voor de uitvulmachine voor infuusflesse
Bepaling van spoelmonsters
Tijdens de reingingsvalidatie worden tegelijkertijd de
uitvulleidingen en uitvulapparatuur gecontroleerd op
reiniging. Een overzicht van de te reinigen apparatuur
inclusief het monsterafname punt is weergegeven in
Figuur 2. Monstername voor beide vaten vindt plaats
bij de uitvulmachine voor infuuszakken (PP-Jouhsen).
Dit uitvulpunt is tevens representatief voor de uitvulmachine voor infuusflessen (Plumatex).
Figuur 2 overzicht van de bereidingsvaten 50L
en 400L. Aangegeven in rood zijn de monsterafnamepunten. ►
Figuur 2 overzicht van de bereidingsvaten 50L en 400L. Aangegeven in rood z
Naast het meten van het laatste spoelwater zijn er ook Naast
monsters
een
additionele
spoelgang van
10L.
hetgemeten
meten na
van
het
laatste spoelwater
zijn
er De
ookbereiding
monsters gemeten na
van bupivacaïne in het 400L vat verloopt via het vigerende
Voor hetvan
50Lbupivacaïne
vat is dit protocol
aangepast
naar
de minimale
10L.protocol.
De bereiding
in het
400L vat
verloopt
via het vigerende
batchgrootte van 15L, welke in dit vat bereid wordt.
dit protocol aangepast naar de minimale batchgrootte van 15L, welke in dit va
Resultaten en discussie
Acceptatielimieten
Resultaten en discussie:
De acceptatielimiet
voor de actieve component, gemeten met de LCMSMS, is berekend op zowel de doserings-, de toxicoAcceptatielimieten
logische
als de 10 ppm voor
limiet.de
In onderstaande
tabel is voor
de strengste
gekozen (voor
beide vaten
toxicologische
De acceptatielimiet
actieve component,
gemeten
met limiet
de LCMSMS,
is berekend
opde
zowel
de
limiet).
Tevensde
staan
in deze tabel (zie
de limieten
voor de tabel
geleidbaarheid,
hetstrengste
kiemgetal, limiet
de endotoxinen
doserings-,
toxicologische
als Tabel
de 102)ppm
limiet.weergegeven
In onderstaande
is voor de
gekozen
en
het TOC-gehalte.
(voor
beide vaten de toxicologische limiet). Tevens staan in deze tabel (zie Tabel 2) de limieten
weergegeven voor de geleidbaarheid, het kiemgetal, de endotoxinen en het TOC-gehalte.
Tabel 7 acceptatielimieten per vat tijdens de reinigingvalidatie
Tabel 6 acceptatielimieten per vat tijdens de reinigingvalidatie
LCMSMS
Vat
Visueel
TOC
Geleidbaarheid
(MACO)
50L
schoon
≤ 28,98 mg
≤ 500 µg/l
≤ 5 µS/cm
400L schoon
≤ 0,135 mg
≤ 500 µg/l
≤ 5 µS/cm
Kiemgetal
Endotoxinen
≤ 10 KVE/100 ml
≤ 0,25 EU/ml
≤ 10 KVE/100 ml
≤ 0,25 EU/ml
Er is
is gekozen
gekozenvoor
voordede
TOC-limiet
uitEuropese
de Europese
Pharmacopee
7.0 voor
en niet
het omrekenen
Er
TOC-limiet
vanvan
WFIWFI
uit de
Pharmacopee
Ed. 7.0Ed.
en niet
het voor
omrekenen
van de
van
de
MACO
waarde
van
bupivacaïne
naar
de
overeenkomstige
TOC-waarde.
In
het
vat
wordt
namelijk
MACO waarde van bupivacaïne naar de overeenkomstige TOC-waarde. In het vat wordt namelijk niet alleen
bupiva-niet
alleen bupivacaïne bereidt en de TOC-waarde is een weergave van alle koolstof aanwezig in het spoelwater.
caïne bereidt en de TOC-waarde is een weergave van alle koolstof aanwezig in het spoelwater. Ook de eisen voor het
Ook de eisen voor het kiemgetal en de endotoxinen komen uit de Europese Pharmacopee Ed. 7.0, waarbij de
kiemgetal en de endotoxinen komen uit de Europese Pharmacopee Ed. 7.0, waarbij de eis voor WFI in bulk is aangeeis voor WFI in bulk is aangehouden. Vanwege het feit dat de geleidbaarheidseis voor WFI dermate laag is
houden. Vanwege het feit dat de geleidbaarheidseis voor WFI dermate laag is (< 1,1 µS/cm bij 20°C) en off-line bepaald
(< 1,1 µS/cm bij 20°C) en off-line bepaald wordt door opgelost CO2 is de acceptatielimiet gebaseerd op de
wordt
door opgelost CO2
is de
acceptatielimietingebaseerd
op de kwantificeringslimiet voor natriumchloride in WFI.
kwantificeringslimiet
voor
natriumchloride
WFI.
Validatie van de LCMSMS-methode
Tabel 3 laat een overzicht zien van de gevonden validatie parameters voor bupivacaïne gemeten met de
LCMSMS. Bereidingen bevatten vaak hulpstoffen. De bepaling van bupivacaïne is gevalideerd voor
bereidingen die natriumchloride als matrix bevatten. Als monstervoorbewerking is alleen verdunning met
Validatie
van de LCMSMS-methode
water/0,1% mierenzuur noodzakelijk. Vanuit de validatie is gebleken dat het kleine percentage
natriumchloride
als matrix
voor ionvasuppressie of
ionzorgt
enhancement.
De bupivacaïne
standaarden
Tabel
3 laat een overzicht
zienniet
vanzorgt
de gevonden
niet
voor ion suppressie
of ion enhancement.
De
verdund
in
WFI/0,1%
mierenzuur
zijn
in
de
sample
tray
echter
géén
dag
houdbaar.
De
methode
is lineair
lidatie parameters voor bupivacaïne gemeten met de
bupivacaïne standaarden verdund in WFI/0,1%
mierenover een Bereidingen
bereik van 0,15
- 1,5vaak
µg/lhulpstoffen.
en heeft voldoende
juistheid
met
waarden
kleiner
5%,
LCMSMS.
bevatten
De
zuur zijneninprecisie
de sample
tray
echter géén
dagdan
houdbaar.
waar
als
eis
10%
gesteld
is.
De
kwantificeringslimiet
(LLOQ)
is
0,15
µg/l
met
een
juistheid
en
precisie
lager
bepaling van bupivacaïne is gevalideerd voor bereidinDe methode is lineair over een bereik van 0,15 - 1,5
µg/l
dan
de
gestelde
eis
van
15%.
gen die natriumchloride als matrix bevatten. Als monen heeft voldoende juistheid en precisie met waarden
stervoorbewerking is alleen verdunning met water/0,1%
kleiner dan 5%, waar als eis 10% gesteld is. De kwantiTabel 7 overzicht validatie data van de analyse van bupivacaïne op LCMSMS
mierenzuur noodzakelijk. Vanuit de validatie is gebleken
ficeringslimiet (LLOQ) is 0,15 µg/l met een juistheid en
Statistische
Niveau
Waarde
dat het kleine percentage natriumchloride als matrix
precisie lager dan de gestelde eis van 15%.
parameters
Bereik
0,15 – 1,5 µg/l
Correlatie coëfficiënt
0,9976
Stabiliteit sample tray
< 12u
Matrix effect
< 5%
20
Juistheid
(N = 9)
LLOQ
8,49%
OC-1
2,74%
QC-2
0,62%
QC-3
1,17%
Precisie (N = 9)
LLOQ
Intra-dag = 6,79%
Inter-dag = 13,00%
bereidingen die natriumchloride als matrix bevatten. Als monstervoorbewerking is alleen verdunning met
water/0,1% mierenzuur noodzakelijk. Vanuit de validatie is gebleken dat het kleine percentage
natriumchloride als matrix niet zorgt voor ion suppressie of ion enhancement. De bupivacaïne standaarden
verdund in WFI/0,1% mierenzuur zijn in de sample tray echter géén dag houdbaar. De methode is lineair
over een bereik van 0,15 - 1,5 µg/l en heeft voldoende juistheid en precisie met waarden kleiner dan 5%,
waar als eis 10% gesteld is. De kwantificeringslimiet (LLOQ) is 0,15 µg/l met een juistheid en precisie lager
dan de gestelde eis van 15%.
A
Extr ct
Tabel 8 overzicht validatie data van de analyse van bupivacaïne op LCMSMS
Tabel 7 overzicht validatie data van de analyse van bupivacaïne op LCMSMS
Statistische
Niveau
Waarde
parameters
Bereik
0,15 – 1,5 µg/l
Correlatie coëfficiënt
0,9976
Stabiliteit sample tray
< 12u
Matrix effect
< 5%
Juistheid (N = 9)
LLOQ
8,49%
OC-1
2,74%
QC-2
0,62%
QC-3
1,17%
Precisie (N = 9)
LLOQ
Intra-dag = 6,79%
Inter-dag = 13,00%
Bepaling van de QC-1
recovery
Intra-dag = 2,54%
Inter-dag = 2,33%
De recovery is bepaald op de QC-2
2 coupures afzonderlijk
en bedraagt
105,7% ±Inter-dag
1,18%. Het
alleen nemen van
Intra-dag
= 1,56%
= 4,34%
de spoelmonsters (en dus geen
swab-monsters) isIntra-dag
geborgd door
een goede recovery
feit dat de
QC-3
= 2,41%
Inter-dagen
= het
1,82%
producten die bereid worden in het vat goed wateroplosbaar zijn.
Bepaling van de recovery
Bepaling
van de recovery
Reinigingsvalidatie van de
De recovery is bepaald op de 2 coupures afzonderlijk en bedraagt 105,7% ± 1,18%. Het alleen nemen van
bereidingsvaten
Reinigingsvalidatie
van
de bereidingsvaten
de recovery
spoelmonsters
(en
swab-monsters)
De
is bepaald
op dus
de 2 geen
coupures
afzonderlijk
en is geborgd door een goede recovery en het feit dat de
De
reiniging
van
het 50L
bereidingsvat
bestaat
uit het spoelenzijn.
van het vat met 25L heet WFI, daarna een
producten
die
bereid
worden
in het
vatvan
goed
wateroplosbaar
bedraagt
105,7%
± 1,18%.
Het
alleen
nemen
de spoelDe reiniging van het 50L bereidingsvat bestaat uit het spoefiltertest met 25L koud WFI en vervolgens het spoelen van het vat inclusief de uitvulmachine met drie keer
monsters (en dus geen swab-monsters) is geborgd door
len van het vat met 25L heet WFI, daarna een filtertest met
50L heet WFI. Tabel 4 laat de resultaten zien na elke spoelgang van 50L. Hieruit blijkt dat na een eerste
een goede
recovery en het feit dat de producten
diebereidingsvaten
bereid
25L koud
en vervolgens het
spoelengehaald.
van het vat
incluReinigingsvalidatie
van
de
spoelstap van 50L de acceptatielimieten zowel fysisch-chemisch
alsWFI
microbiologisch
worden
Hierop
worden
in
het
vat
goed
wateroplosbaar
zijn.
De
reiniging
van
het
50L
bereidingsvat
bestaat
uit
het
spoelen
van
het
vat
met
25L
heet
WFI,
daarna
een
sief
de
uitvulmachine
met
drie
keer
50L
heet
WFI.
Tabel
4
is de spoelprocedure aangepast naar twee keer 50L in plaats van drie keer.
filtertest met 25L koud WFI en vervolgens het spoelen vanlaat
hetdevat
inclusief
met50L.
drie keer
resultaten
ziende
nauitvulmachine
elke spoelgang van
50L heet
WFI. Tabel 4 laat van
de resultaten
zien na elke spoelgang
van dat
50L.
blijkt
dat navan
een
eerste
Hieruit blijkt
na Hieruit
een eerste
spoelstap
50L
de accepTabel
8 reinigingsvalidatie
het 50L vat
spoelstap van 50L de acceptatielimieten
zowel
fysisch-chemisch
als
microbiologisch
worden
gehaald.
Hierop
tatielimieten
zowel
fysisch-chemisch
als
microbiologisch
LCMSMS
TOC
Geleidbaarheid Kiemgetal
Endotoxinen
Visueel
isSpoelstap
de spoelprocedure
aangepast
naar
twee
keer
50L
in
plaats
van
drie
keer.
worden
gehaald.
Hierop
is
de
spoelprocedure
aangepast
(mg)
(µg/l)
(µS/cm)
(KVE/ml)
(EU/ml)
naar twee
keer 50L in0plaats van drie keer.
Tabel
9 reinigingsvalidatie
het 50L
vat
4,25
± 3,32
145,6 ± 87,4 1,94
± 1,36
1ste 50L
schoon van
< 0,005
Tabel 8 reinigingsvalidatie van het 50L vat
de
2 50L
schoon
0,94
±
0,08
104,5
±
65,6
0,96
±
0,11
0
<
0,005
LCMSMS
TOC
Geleidbaarheid Kiemgetal
Endotoxinen
Spoelstap
Visueel
de
(mg)± 0,12
(µg/l)
(µS/cm)
(EU/ml)
schoon
0,68
61,8
± 33,3
0,85
± 0,02
0(KVE/ml)
<
0,005
3 50L
4,25 ± 3,32
145,6 ± 87,4 1,94 ± 1,36
1ste 50L
schoon
0
< 0,005
De
vanschoon
het 400L vat
is ±gevalideerd
in twee
configuraties.
Configuratie
spoelstappen
2dereiniging
50L
0,94
0,08
104,5
± 65,6
0,96 ± 0,11
0 1 bestaat uit
<4
0,005
van
de elk 25L via vat en uitvulmachine. In deze opstelling is gebruik gemaakt van een filtercascade. Tabel 5
schoon
0,68 ± 0,12
61,8 ± 33,3
0,85 ± 0,02
0
< 0,005
3 50L
laat de resultaten zien die verkregen zijn na een additionele spoelgang van 10L. Hieruit blijkt dat de
concentraties
met
de LCMSMS
ongeveer
een
bovenisde
acceptatielimiet
ligt.
De reiniging vanbupivacaïne
het 400L vat isgemeten
gevalideerd
in twee
confidat het
nietfactor
geheel25
duidelijk
waar
de verontreinigingen
De reiniging
van
het
400L
vat
is gevalideerd
in niet
tweegemeten,
configuraties.
Configuratie
1 bestaat
uit
4 spoelstappen
Het
TOC-gehalte
is
in
de
additionele
spoelgang
echter
mepivacaïne
(bereidt
in
hetzelfde
vat)
guraties.
Configuratie
bestaat
uit 4 spoelstappen
vanopstelling
elk
vandaan
zijn gekomen
(afsluiters,
filterhuizen,
etc.)
van
elk
25L
via vat1en
In deze
isprecies
gebruik
gemaakt
van
filtercascade.
5
is
wel
teruggevonden
inuitvulmachine.
zeer lage concentraties
met behulp
van LCMSMS.
Om
te een
achterhalen
waar Tabel
de
25L
via
vat
en uitvulmachine.
Inverkregen
deze opstelling
isna
gebruik
en spoelgang
het tevens terugvinden
van
mepivacaïne
wat
met TOC
laat
de
resultaten
zien
die
zijn
een
additionele
van
10L.
Hieruit
blijkt
dat
de
verontreinigingen vandaan komen, is de filtercascade op verschillende punten bemonsterd, waarbij zowel
gemaakt
van eenbupivacaïne
filtercascade.gemeten
Tabel 5 laat
de resultaten
nooit gelukt
zou zijn,
besloten
de configuratie teligt.
verconcentraties
met
de LCMSMS concentraties
ongeveer
eenzijn
factor
25isboven
deom
acceptatielimiet
verhoogde
TOC-waarden als
verhoogde
bupivacaïne
teruggevonden
(resultaten
niet
zien
die
verkregen zijn
na de
eenadditionele
additionele spoelgang
van
eenvoudigen.
De filtercascade
is vervangen
door eenvat)
“disHet
TOC-gehalte
is
in
spoelgang
niet
gemeten,
echter
mepivacaïne
(bereidt
in
hetzelfde
getoond).
10L.
Hieruit
blijkt dat
de deze
concentraties
geme-methet
eindfilter
en
hette
spoelvolume
is aangepast.
is wel
teruggevonden
in zeer
lagebupivacaïne
concentraties
behulp
vanhet
LCMSMS.
Om
achterhalen
waar
Naar
aanleiding
van
tegenvallende
resultaten,
feitposable”
dat
niet geheel
duidelijk
is waar
de de In deze
ten
met de LCMSMS precies
ongeveervandaan
een
factorzijn
boven
de (afsluiters,
verontreinigingen
vandaan
komen,
is25de
filtercascade
op verschillende
punten
bemonsterd,
zowel
configuratie
is ook
het 50L
bereidingsvat
gevalideerd,
zoals
verontreinigingen
gekomen
filterhuizen,
etc.)
en
het tevens waarbij
terugvinden
van
verhoogde TOC-waarden
verhoogde
bupivacaïne
concentraties
zijn
teruggevonden
(resultaten
niet
acceptatielimiet
ligt. met
Het TOC-gehalte
is in de additionele
hierboven
beschreven.
De
van het 400L
vat in conmepivacaïne
wat
TOCals
nooit
gelukt
zou
zijn, is besloten
om de configuratie
tereiniging
vereenvoudigen.
De
getoond).niet is
spoelgang
gemeten,
echterdoor
mepivacaïne
(bereidt in eindfilter figuratie
2 verloopt als volgt:
spoelen vanIn
hetdeze
vat met 200L
filtercascade
vervangen
een “disposable”
en het spoelvolume
is aangepast.
Naar aanleiding
van
deze
feit
datWFI,
hetdrainage
niet
geheel
duidelijk
is opnieuw
waar van
despoelen
hetzelfde
vat) is
teruggevonden
in zeer lageresultaten,
concentra- het
heet
via uitvulslang
en
configuratie
is wel
ook
het
50Ltegenvallende
bereidingsvat
gevalideerd,
zoals
hierboven
beschreven.
De reiniging
het van
verontreinigingen
precies
zijnvolgt:
gekomen
etc.)
enWFI,
hetmet
tevens
terugvinden
400L
vat
in configuratie
2 vandaan
verloopt
als
spoelen
van het
vatinclusief
met 200L
heet
drainage
via
ties
met
behulp
van LCMSMS.
Om te achterhalen
waar
de(afsluiters,
hetfilterhuizen,
vat
uitvulmachine
150L heet
WFI. Tus- van
mepivacaïne
met TOC
nooit
gelukt
om
configuratie
tewordt
vereenvoudigen.
uitvulslang
enwat
opnieuw
spoelen
het zou
vat zijn,
inclusief
uitvulmachine
met 150Ldoor
heet
WFI.
de 5 De
verontreinigingen
vandaan
komen,
is van
de
filtercascade
op is besloten
sen
dede
spoelstappen
erTussen
gedurende
minuten
filtercascade
is
vervangen
door
een
“disposable”
eindfilter
en
het
spoelvolume
is
aangepast.
In
deze
spoelstappen
door
wordt
er
gedurende
5
minuten
gemengd
in
het
vat.
De
geleidbaarheid,
het
kiemgetal
ende
verschillende punten bemonsterd, waarbij zowel verhoogde
gemengd in het vat. De geleidbaarheid, het kiemgetal en
configuratie
is ook
het
50L
bereidingsvat
gevalideerd,
zoals
hierboven
beschreven.
De reiniging
van
het
de
endotoxinen
zijn
niet
meer
gemeten,
omdat
deze
al
voldoen
in
de
eerste
configuratie
met
veel
minder
TOC-waarden als verhoogde bupivacaïne concentraties zijn
endotoxinen zijn niet meer gemeten, omdat deze al voldoen
400L vat in configuratie 2 verloopt als volgt: spoelen van het vat met 200L heet WFI, drainage via
spoelen.
teruggevonden (resultaten niet getoond).
in de eerste configuratie met veel minder spoelen.
uitvulslang en opnieuw spoelen van het vat inclusief uitvulmachine met 150L heet WFI. Tussen de
Naar
aanleiding
van
deze
tegenvallende
resultaten,
het
feit
spoelstappen
door van
wordt
gedurende
5 minuten
gemengd
in het vat. De geleidbaarheid,
het volgens
kiemgetal en
Tabel
9 resultaten
deer
10L
additionele
spoelstap
in de reinigingsvalidatie
van het 400L vat
Tabel
10 resultaten
vanniet
de 10L
additionele
spoelstap
de reinigingsvalidatie
het configuratie
400L vat volgens
1 en 2
de endotoxinen
meer
gemeten,
omdat in
deze
al voldoen in de van
eerste
metconfiguratie
veel minder
configuratie
1 enzijn
2
spoelen.
LCMSMS
TOC
Geleidbaarheid Kiemgetal
Endotoxinen
Spoelstap
Visueel
(mg)
(µg/l)
(µS/cm)
(KVE/ml)
(EU/ml)
Tabel 9 resultaten van de 10L additionele spoelstap
in de reinigingsvalidatie van het 400L vat volgens
Configuratie 1 schoon 3,68 ± 0,40
NB*
1,17 ± 0,11
0
< 0,005
configuratie 1 en 2
± 0,04
200,4
NB
Configuratie 2 schoon 1,40
LCMSMS
TOC ± 6,78 NB
Geleidbaarheid NB
Kiemgetal
Endotoxinen
Visueel
* Spoelstap
NB
=
niet
bepaald
(mg)
(µg/l)
(µS/cm)
(KVE/ml)
(EU/ml)
* NB = niet bepaald
Configuratie 1 schoon 3,68 ± 0,40
NB*
1,17 ± 0,11
0
< 0,005
Zoals getoond in Tabel 5, voldoet de TOC-waarde aan de gestelde eisen voor configuratie 2. De hoeveelheid
200,4 ± 6,78 NB
Configuratie 2 schoon 1,40 ± 0,04
NB
NB
bupivacaïne gemeten met de LCMSMS is significant verbeterd in vergelijking met configuratie 1, maar is nog
*
NB
=
niet
bepaald
steeds een factor 10 te hoog t.o.v. de acceptatielimiet. Omdat het TOC-gehalte voldoet en de aanpassingen
21
hebben geleid tot een verbeterde reiniging is er een risicoanalyse uitgevoerd wat de consequenties zijn van
Zoalshoeveelheid
getoond in Tabel
5, voldoet
TOC-waarde
aan de gestelde
voor
2. De
hoeveelheid
deze
bupivacaïne
nog de
aanwezig
na reiniging.
Naast heteisen
feit dat
deconfiguratie
toxicologische
limiet
zeer
bupivacaïne
gemeten met
verbeterd
in zijn
vergelijking
met86
configuratie
1, maar is is
nog
streng
is, in vergelijking
totdedeLCMSMS
10 ppm isensignificant
doseringslimiet
(deze
664 mg en
mg, respectievelijk),
steeds
een
factor
10
te
hoog
t.o.v.
de
acceptatielimiet.
Omdat
het
TOC-gehalte
voldoet
en
de
aanpassingen
er ook gekeken naar de hoeveelheid bupivacaïne, die overgedragen kan worden in alle bereidingen die in het
hebben
totgemaakt.
een verbeterde
reinigingper
is er
een risicoanalyse
watwaar
de consequenties
400L
vatgeleid
worden
Als maximum
aflevereenheid
is 11 uitgevoerd
µg gevonden,
een plasma zijn van
A
Extr ct
Zoals getoond in Tabel 5, voldoet de TOC-waarde aan de
gestelde eisen voor configuratie 2. De hoeveelheid bupivacaïne gemeten met de LCMSMS is significant verbeterd
in vergelijking met configuratie 1, maar is nog steeds een
factor 10 te hoog t.o.v. de acceptatielimiet. Omdat het TOCgehalte voldoet en de aanpassingen hebben geleid tot een
verbeterde reiniging is er een risicoanalyse uitgevoerd wat
de consequenties zijn van deze hoeveelheid bupivacaïne
nog aanwezig na reiniging. Naast het feit dat de toxicologische limiet zeer streng is, in vergelijking tot de 10 ppm en
doseringslimiet (deze zijn 664 mg en 86 mg, respectievelijk),
is er ook gekeken naar de hoeveelheid bupivacaïne, die
overgedragen kan worden in alle bereidingen die in het
400L vat worden gemaakt. Als maximum per aflevereenheid
is 11 µg gevonden, waar een plasma concentratie van
bupivacaïne van boven de 4 µg/ml toxisch is [2]. De toediening van één van de producten bereidt in het 400L vat
zal nooit leiden tot een hoeveelheid van meer dan 11 µg
bupivacaïne in de patiënt.
Hiermee is de reiniging van het 400L vat geborgd gebruikmakend van configuratie 2.
Conclusie
De gevalideerde LCMSMS methode is gevoelig en nauwkeurig genoeg om gebruikt te worden als methode om
reiniging van apparatuur te valideren. De LCMSMS-methode
kan gebruikt worden als screeningstechniek en is specifiek
voor de actieve component(en) in tegenstelling tot TOC,
waar alle koolstof-bevattende verontreinigingen worden
gemeten. Ook de TOC-methode kan goed ingezet worden
voor reingingsvalidatie, echter TOC is alleen geschikt voor
water-oplosbare componenten. De hier gepresenteerde
22
resultaten laten zien dat de reinigingsvalidatie voor zowel
het 400L vat als het 50L vat geborgd zijn. Hierbij moet
echter wel opgemerkt worden dat een risico-analyse noodzakelijk is geweest voor het 400L vat op basis van een
MACO die 10 keer te hoog is ten opzichte van de gestelde
acceptatielimiet. De reinigingsvalidatie heeft geleid tot
aanpassing van de bereidingsopstelling, waarbij nu het
eindfilter onder LAF-condities geplaatst kan worden en er
alleen nog filters voor eenmalig gebruik ingezet worden.
Dankwoord
Peter ter Horst, ziekenhuisapotheker laboratorium Isala
klinieken en Ronald van de Laak en Zeger de Vente van
Beun - De Ronde worden bedankt voor de bepalen van de
TOC-gehaltes.
Reference List
1 Wieling, J. e.a. Rational experimental design for
bioanalytical methods validation. Illustration
using an assay method for total captopril in
plasma. Journal of Chromatography A 730(1-2)
381-394 1996
2 Ellenhorn’s Medical Toxicology. Diagnosis and
Treatment of Human Poisoning. M.J. Ellenhorn
2nd edition 1997

Download Report