Table S4 – List of primers, specific PCR conditions, plasmid constructs and strains used for heterologous expression of FSY1 homologues in S. cerevisiae hxt-null. Species/strain Gene Primer Sequence (5’ 3’) Primers b GAAAGAAAGCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCATGGGTGTCGTACACGACCTG b TGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGTCAGTCCTCCTTCGGCGGC An_p415FSY_Fw An_p415FSY_Rv Annealing temperature 59ºC pCGFRUY24 FSY1 A. niger (ATCC 16404) “yeast-like” FSY1 Plasmids An_FSY_Fw ATGGGTGTCGTACACGACCTG An_FSY_Rva TCAGTCCTCCTTCGGCGGCG An_p415FSYb_Fwb GAAAGAAAGCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCATGGGCGATAATTATGAGGA An_p415FSYb_Rvb TGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGTTAGGCGTTGTAGTTATC An_FSYb_Fw ATGGGCGATAATTATGAGGA An_FSYb_Rv TTAGGCGTTGTAGTTATC 59ºC 52ºC pCGFRUY19 52ºC Calb_p415FSY_Fwb C. albicans (PYCC 3436T) C. arabinofermentans (PYCC 5603T) Calb_p415FSY_Rv b 56ºC CGTGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGAGTCAACGGCCCCAGAACCTC pCGFRUY22 FSY1 Calb_FSY_Fw ATGCTGTCTGTTTCACTGGA Calb_FSY_Rva TCAACGGCCCCAGAACCTCTT 56ºC Cara_p415FSY_Fwb FSY1 Cara_p415FSY_Rv b Lstar_p415FSY_Fwb L. starkeyi (PYCC 4045T) GCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCTAGAATGCTGTCTGTTTCACTGGAAAAG Lstar_p415FSY_Rv b GCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCTAGAATGTCTAATATTAATGAAGT 46ºC pCGFRUY17 CGTGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGAGGTAAAAATGTTGGTTATTAG GCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCTAGAATGGTTTCTGAGAAGAAATTGC 54ºC CGTGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGAGCTAAGCCTCTCCCTCCC pCGFRUY21 FSY1 Lstar_FSY_Fw ATGGTTTCTGAGAAGAAATTGCA Lstar_FSY_Rv CTAAGCCTCTCCCTCCC 54ºC Suva_p415FSY_Fwb S. uvarum (CBS 7001) Suva_p415FSY_Rv b GAAAGAAAGCATAGCAATCTAATCTAAGTTTTAATTACAAATCATGTCTCATGTTAACGCGTC 52ºC TGAATGTAAGCGTGACATAACTAATTACATGACTCGTTAATAACTCAATTGGCCCTT pCGFRUY26 FSY1 Suva _FSY_Fw ATGTCTCATGTTAACGCGTC Suva_FSY_Rv TTAATAACTCAATTGGCCCTT 52ºC S. cerevisiae (EBY.VW4000) MATα leu2-3,112 ura3-52 trp1-289 his3-Δ1 MAL2-8c SUC2 hxt17Δ hxt13Δ::loxP hxt15Δ::loxP hxt16Δ::loxP hxt14Δ::loxP hxt12Δ::loxP hxt9Δ::loxP hxt11Δ::loxP hxt10Δ::loxP hxt8Δ::loxP hxt514Δ::loxP hxt2Δ::loxP hxt367Δ::loxP gal2Δ snf3Δ::loxP stl1Δ::loxP agt1Δ::loxP ydl247wΔ::loxP yjr160cΔ::loxP Ref. [50]
© Copyright 2024 ExpyDoc
