Protocolo para aislamiento de Fusarium oxysporum f. sp. cubense Aislamiento de hongo a partir de material vegetal infectado 1. A partir de material vegetal colectado en campo, corte pequeñas secciones de haces vasculares de 1cm de largo y desinfecte por 1.5minutos en una disolución de hipoclorito de sodio 1.5%. 2. Transfiera los segmentos con una pinza estéril en un recipiente con agua destilada estéril, agite para eliminar el hipoclorito residual, por 2 minutos. 3. Traslade las muestras desinfectadas a una sección de papel absorbente estéril para eliminar el exceso de humedad. (del paso 1 al 4 debe realizarse en cámara de flujo laminar bajo condiciones de asepsia). 4. Tome las pequeñas secciones limpias y transfiéralas a una placa de Petri con medio PDA enmendado con antibiótico, es conveniente que ubique 3 o cuatro secciones por placa y que realice al menos 3 placas por cada muestra. Recuerde sellar las placas con parafilm o plástico adherente para evitar contaminaciones. 5. Rotule las placas Petri en la base, con código y fecha de preparación. 6. Coloque las muestras en incubadora a 25-27°C. 7. Realice observaciones para detectar la posible presencia de crecimiento de micelio después de 48 horas, en caso de obtener crecimientos fungosos, transferir a una nueva placa con medio PDA enmendado con antibiótico. 8. Permita el crecimiento de la colonia durante 7-10 días. MSc. Ana Tapia Fernández- MSc. Gerardo Pérez León