LCtalk 逆相クロマトグラフィー ４年 平野 孝明 2005/11/11 ・分配クロマトグラフィー ・逆相 (Reversed Phase)クロマトグラフィー 固定相の極性＜移動相の極性 ・順相 (Normal Phase)クロマトグラフィー 固定相の極性＞移動相の極性 ・逆相クロマトグラフィーの原理 弱 ＜ 中 ＜ 黄 疎水的相互作用 の強さ ・逆相クロマトグラフィーで用いられる固定相の状態 シラノール基 にODS化剤 を結合する CH3 Cl O Si C18H37 CH3 O-Si CH3 CH3 O-Si CH3 CH3 シリカゲル表面 極性が低く表面積が大きい ・逆相カラムの固定相（充填剤）の種類 ・無機系充填剤 測定pH条件 2～8程度 種類 シリカゲル，アルミナ，ジルコニア，チタニア.etc. ・樹脂系充填剤 測定pH条件 2～13程度 種類 スチレン－ジビニルベンゼン共重合体，ポリメタクリレート， 天然高分子ゲル.etc. Si-O-Si(CH3)2C18H37 Si-OH+HO-Si(CH3)2C18H37 ・有機溶媒の種類 ・カラム圧力の違い ・逆相クロマトグラフィーで用いられる固定相の状態 シリカゲル表面 シラノールにODS基を結合 ・溶出速度の違い ・溶出選択性の違い ・緩衝液ｐＨとｐＫａの関係性 エンドキャッピング シラノール基 にODS基 を結合する CH3 Silica gel 表面 H3C Si• CH3 TriMethylSilyl ・スチレン－ジビニルベンゼン共重合体 H2 H C C H2 H2 C CH C H C H2 C H2 C H2 C C H H C H2 C H C H2 C ODS充填剤表面で起きる相互作用 ・逆相クロマトグラフィーで分離可能な化合物の種類 ビタミン，有機酸，核酸，糖類，アミノ酸，タンパク質,ペプチド ・逆相クロマトグラフィーでの移動相溶媒の極性の順 序： ヘキサン＜イソプロピルエーテル＜ベンゼン＜エチルエーテ ル＜クロロホルム＜ジクロロメタン＜アセトン＜酢酸エチル ＜アセトニトリル＜エタノール＜メタノール＜水
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