No.160192… 1 錦鯉 特定疾病検査結果報告書 LABORATORY RESULTS REPORT 1. 生 産 地 生 産者 (Place of harvest) (PЮ 養 殖 場名 所在地 duccr): 体 松 夫 (MRo MATSUO NIATSIIDA) (Farm.namc):松 田養 鯉 場 (NIIATSllDA KOI FARM) : 940- H04 〒 (Fann, addrcss 2.検 松 田 : 新潟県 1462, Settayalnachi, Nagaoka― (Agc): 5ヶ 平均全長 shi,Niigata,940… 1104, Japan (Sample) ニ シキ ゴイ (Koi Carp/の ″ノ ″ ″ s cα 魚 種名 (Common namc/Scicntiic nalnc): 魚齢 摂 田屋 町 1462 長 岡市 月 ( 5 mOnths) (Avcragc of totd lcngth): 15.O cm 平均体重 "0わ (Avcrttc of bo街 プ ) wcight): 56.0 2 ): 2016年 11月 15日 (Nov.15.2016) temperature tt time of sampli鴫 ):18℃ 検 査 魚 採 取 日 (Date of sampl範 検 査魚採 取 時 の水温 (Watcr 備 考 (Notc):検 査 魚 の採 取 は生 産 者 が行 つ た。 全 長 と体 重 は検 査 機 関 に て 測 定 した。 (Saln,血 g was carrlcd out by thc oroduccr Total lcnpm and bodv weittt were measured h the laboratory) 3. 検 査 方 法 と結 果 (Methods and results of test) (1)コ イ ヘ ル ペ ス ウイ ル ス 病 ease,KIm) (Koi herpesvirlls dお ● Ⅳ ゲ ノ ム DNAの 検 出 は 、KIIV Sph 1 5プ ラ イ マ ー セ ッ トを 用 い た 2005)に よ リイ 子つ た 。 PCR法 (Gray ι′αた 2002 and Yuasaグ α′ " 。 っ2002 and {Detection of a KHV gcnomic DNA was pcrforlned by PCR mcthods using KHV Sph I-5 primer set(Gray′ ′α′ Yuasa`′ αl,2005).} 結 果 (Resul愧 ): 試料作成 日 (NEGATIVE) 陰 性 (Nov. 21.2016) 24日 (Nov.24。 2016) (Datc of sample drawn): 2016年 11月 21日 判 定 日 (Datc ofiuぬ cment): 2016年 (2)コ イ 春 ウイ ル ス血 症 11月 (Spring宙 remia of carp,SVC) 試 料 は 、OIE"Manud of Dittno■ ic Tctts for Aquttic AnimJs‐ 2016‐ "の 第 2.3.9章 4条 の 記 述 に 従 つ て 検 査 した 6 (SalnDICS WCrc tcstcd accordinA to mcthods described in OE"Manual of DiaAnostic Tests for Aquatic Animals‐ Chaptcr 2.3.9.,Article 4.) 結 果 (Results): (NEGATIVE) 陰 性 (Nov. 16. 2016) 1日 (Dec. 1. 2016) 試 料 作 成 日 (Datc of samplc dralvn) : 2016年 11月 16日 判 定 日 (Datc of iuttement) : 12月 署名者名・ 役職 理 学博 士 2016年 (Nalnc and Titlc of Ce■ 三 木 誠 :検 査 員 (Dr,Makoto Miki:IIllsDeCtOr) 長 部 斎 :代 表 取 締 役 日付 ifler) (Date) : 2016年 12月 (Mr.Hitoshi Osabc:Director) 5日 (Dec 5. 2016) 新 潟 県 輸 出錦 鯉 衛 生 証 明書 発 行 等 取 扱 要 領 検 査 機 関 (株 )県 都 食 品 環 境 分 析 セ ン タ ー 〒 950‐ 0022 新 潟 県 新 潟 市東 区幸 栄 1丁 目 7… 12 Kelllto Food and Environment Anaけ siS Center Co。 ,Ltd l¨ 7‐ E¨ 12,Koci,IIigashi¨ ku,Nligata中 shi,Niigata,950‐ mait kCnt08890@ab auOnc‐ nctjP,TEL;+81‐ 25‐ 270‐ 0022,Japan 8890,FAX;+81‐ 25‐ 270‐ 8132 2016-" No。 160192… 2 結 果 証 明書 CERTIFICATION RESULTS 個 体 総 数 (Totd numbcr of tcstcd ish):30尾 (30■ shcs) ;5尾 検 体 数 (TotJ numbcr of tcstcd samplcs):6検 体 (1)コ イ ヘ ル ペ ス ウイ ル ス ・ 検 査 魚 由来 の ゲ ノ ム 検 出 され な か つ た 。 を 1検 体 と した (6 samplcsi Each sampに consists of ivc ishcs) (Koi Herpesvirus;KIIV) DNAを 鋳 型 と して PCRを 行 つ た結 果 、 コイ ヘ ル ペ ス ウイ ル ス 特 異 的 増 幅 産 物 は KHV spccinc amplilication was not dctcctcd by PCR tcst,whcn gcnomic DNA from tllc samplcs wcrc uscd as tcmplatc) (・ レー ン (lanc) A B C D E F G H I J -5∞ 100 bp 500 bp― 300 bp- bp サ ンプル 結 果 (samplc) (rcsults) A B C D E F G H 分子 量 マー カー (100 bp DNA laddcr) 陰性 対 照 (ncgativc control) salnplc l salnplc 6 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 I 陽性 対 照 (positivc control) 」 分子 量 マー カ ー salnplc 2 salnple 3 salnplc 4 salnplc 5 (ncgttivc) (ncgativc) (ncgativc) (ncgativc) (ncgativc) (ncgativc) (100 bp DNA ladder) 電 気 泳 動 像 (Gcl clcctrophorcJs of PCR products) ′α′2002 備 考 :PCR検 査 (Gr町 ′ αα ′,2005)は 、 ニ シキ ゴイ の鯉 か ら抽 出 した DNAを 鋳型 と して行 われ た。 alld Yuasa ′′α/.2002 and Yuasa`′ {Notc:Thc PCR assav(Gra、 αノ,2005)、 ●s cal■ icd out using gcnomic DNA cxtractcd flom koi carp gills as tcmplatcs) (2)コ イラ 欝 ウ イ ル ス 血L症 ウ イ ル ス ・ ニ シ キ ゴ イ 組 織 磨 砕 液 を 接 種 した (Spring Viremia of Carp Virus;SVCV) EPC細 胞 に お い て 、 細 胞 変 性 効 果 (CPE)は 観 察 され な か っ た 。 Cytophathic cmcct(cPE)was not obscrvcd in EPC cclls inoculatcd with homogcnatc of koi catt tissucs} {。 SVCV分 Platc nurnber; Sample 1 A B 盲 殺Kイ 式 (Blind pass) 離 (Isolation of SVCV in EPC cell culture) 0192 16¨ Sampie 2 Platc numbcL 16¨ 0192-B Sampie 3 Sample 4 Sample 5 Sample ① ①①①①① 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 (Negatve)(Negalve)(Negative)(NegaJve)(Negative)(Negaive) 接 種 サ ンプル 濃 度 (the inal dlution of thc homogcnatc samplcs) Di 1/1000 B:1/1000 El 1/10000 Ci control 123 D E ①①①①①① ①①①①①① 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 陰性 (Negative)(Negative)(Negative)(Negative)(Negative)(Negative) *CTE:コ イ 由来成分 による細胞 へ の影響 (cytOtoxic cttct) CPE― :ウ イ ル ス 陰 性 (nO cytopathic cttct dcvclopcd) (cytopallic cffcct dcvclopcd) 備 考 :RT‐ PCR法 は、細胞培 養 に よるウイル ス検査 において 陽性 を示 した検体 についてのみ行 われ る。 (Notc:RT‐ PCR is perfomed onlv onっ 456 ①①①①①① CPE+:ウ イ ル ス 陽 ′ l■ Fi control Sample Sample Sample F 粒 C 粧 ①①①①①① ①①①①①① A:1/100 Sample Sample Sample 6 oslt市 e samplc Of vrus isoladon test) 田 県都 食 品環 境 分析 セ ン ター Kento Food and Environment Analysis Center Co。 ,Ltd No.CH 16 0192-3 魚 類 特 定 疾 病 等 検 査 結 果 報 告 書 (中 国 向 け ) LABORATORY RESULTS REPORT 1.生 産地 (Place of haⅣ est) (PrOduccr): 生産者 : 2.検 〒 addrcss (Farrn、 松夫 (Farm,nalnc):松 田 養 鯉 場 養 殖場名 所在 地 松 田 940- 1104 : (MR.NIATSUO NIIATSIIDA) (MJSllDA KOI FARM) shi,Niigata,940… 1104, Japan 1462, Settavarnachi, Nagaoka¨ (Sample) 体 ニ シ キ ゴイ (Conlmon naltne/Scicntiic narnc): 魚種名 個 体 総 数 (Total nulnbcr of“ stcd ish):30尾 魚齢 摂 田屋 町 1462 長 岡市 新潟県 (Agc): 平均全長 5ヶ (Koi carp l Cッ ρr滋 0わ プ s“ψ ブ ) “ (30 ishcs) 月 ( 5 Months) (Avertte of total lcngth): 15.O cm 検 査 魚 採 取 日 (Dtte of salnpling): 2016年 平均 体重 11月 15日 (Avertte of boけ wcight): 56.O g (Nov.15.2016) 検 査 魚 採 取 時 の 水 温 (Wttcr temperaturc at timc of salnpling):18℃ 3. 結 果 と検 査 方 法 (Results and Methods of Test) (1)コ 結 果 (2)コ 結 果 (3)伝 結果 (4)ウ 結果 (5)流 結果 イ ヘ ル ペ ス ウイ ル ス 病 (Koi herpesvirus discase,KIm) (Results): (NEGATIVE) (Method:PCR assay) 陰性 イ ラ 静 ウ イ /L/ス 血L症 (Spring viremia of carp,SVC) (Results): (NEGATIVE) (Method:Ⅵ 陰性 染性造血器壊死症 (Results): 陰性 (Infectious haematopoietic necrosis,IHN) (NEGATIVE) (Method:Virus isolation in cell culture) イ ル ス性 出血 性 敗 血 症 (Results): 陰性 行性潰瘍症候群 (Results): 陰性 ※ 検 査 期 間 (Test periOd): rus isolation in cell culture) (Viral haemorrhagic septicacmia,VIIS) (NEGATIVE) (Method:Virus isolation in cell culture) (Epizootic ulcerative syndrome,EUS) (NEGATIVE立 (MethOd:Obsewation of gross sign) KIIV: Nov . 21. 2016 SVC,IHN and VHS: Nov ∼Nov. 16 24. 2016 2016∼ Dec 2016 EUS:Nov.16.2016 備 考 (Note):検 査 方 法 は OIE"Manual of Diagnostic Tetts for Aquttic Animals-2016¨ 三 木 誠 :検 査 員 (Dr.Makoto Miki:Inspector) 長部 斎 :代 表 取 締 役 日付 (Date) : 2016年 12月 (眈 .H■ oshi Osabe:Director) 5日 (Dec. 5.2016) 新 潟 県 輸 出錦 鯉 衛 生 証 明 書 発 行 等 取 扱 要 領 検 査 機 関 腑 県都 食 品環 境 分 析 セ ン ター 〒 950‐ 0022 新 潟 県 新 潟 市 東 区 幸 栄 1丁 目 7-12 Kento Food and Enviromment Analysis Cellter Co。 ,Ltd E¨ mait l‐ 7‐ 12,Koei,Higashi¨ ku,Nligata‐ 血1,Niigatち 950¨ 0022,Japan kellto8890@ab auOnc― nctjp,TEL;+81… 25… 270¨ 8890,FAX;+81‐ 25‐ 270‐ 8132 緩 馴 囃 舗 理学博 士 of Cc■ iflcr) 一 に 打 一 す︲ 鷲 ﹁ ″ 署名 者名 ・ 役職 (Namc and T■ lc "の 記 述 に 準 ず る 。
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