Präsentation Immunhistochemie

Praktikum : Immun Histo Chemie
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Histologie:
Wissenschaft von biologischen Geweben
ApoEko, male
Histologie in der Klinikroutine
practical course
Entnahme von Organ- oder Organteil
Fixierung und
Begutachtung / Bericht
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang
Histologie in der Klinikroutine
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
T1
Tumor 2,0 cm oder weniger in größter Ausdehnung
T1mi
Mikroinvasion 0,1 cm oder weniger in größter Ausdehnung
T1a
Mehr als 0,1 cm, aber nicht mehr als 0,5 cm in größter Ausdehnung
T1b
Mehr als 0,5 cm, aber nicht mehr als 1,0 cm in größter Ausdehnung
T1c
Mehr als 1,0 cm, aber nicht mehr als 2,0 cm in größter Ausdehnung
T2
Tumor mehr als 2,0 cm, aber nicht mehr als 5,0 cm in größter
Ausdehnung
T3
Tumor mehr als 5,0 cm in größter Ausdehnung
T4
Tumor jeder Größe mit direkter Ausdehnung auf Brustwand (T4a)/
Haut (T4b), beides (T4c) oder inflammatorisches Karzinom (T4d)
24 ÄP Gynäkologie 3_2014
Tab. 3: TNM-Klassifikation 2010.
Aerztekammer – bw.de ÄP Gynäkologie 3_2014
Histologie in der Klinikroutine
practical course
Entwässerung und Einbettung,
Schneiden - Färben
Mikroskopische Analyse
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Darstellungen entnommen: Fachbuch „Histotechnik“ von Gudrun Lang
Die Histologie in der Klinikroutine:
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Frühdiagnose von Tumoren
Klassifizierung von Tumoren
Nachweis von
Stoffwechselerkrankungen
Parasitäre oder bakterielle Erkrankungen
Hilfe bei der Therapiewahl
Makro(skopische)- und Mikro(skopische)- analysen
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Der erste Schritt nach der Entnahme: die Fixierung
practical course
Formalin
Alkolhol
nativ
Die Art der Fixierung wird bestimmt durch die Fragestellung:
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Was möchte ich wissen?
Reine Strukturanalyse oder Färbung?
Welche Färbung soll zum Einsatz kommen?
Was soll gefärbt werden?
Die „Einbettung“ als Vorbereitung zum Schneiden
und Aufziehen auf Objektträger
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Schneidetechniken in der Histologie:
Paraffinschnitte
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Natives Material
Vibratom
Ultramikrotom für
Elektronenmikroskopie
Gefrierschnitte
Schneidetechniken in der Histologie:
Gefrierschnitte:
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Färbetechniken in der Histologie:
practical course
Farbreaktionen durch Ionenbindung:
Saure Farbstoffe binden an basische Proteine
Beispiel: H&E ( Kerne blau, Cytoplasma rot )
Enzymhistochemisch:
zelleigene Enzyme bewirken die Farbentwicklung
Immunhistochemie:
Antigen - Antikörperbindung mit anschließender
Chemischer Farbreaktion
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
In- situ Hybridisierung:
Nukleinsäuresequenzen dienen als „Bindungssonden“
Und werden über eine chemische Farbreaktion sichtbar
Gemacht - oder es wird eine Fluoreszens gekoppelte
Nukleinsäuresequenz eingesetzt - FISH
Einsatz in unserem Labor:
practical course
Katerina Vlantis
Katerina Vlantis
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
ApoEko, male
Apostolis Polykratis
Einsatz in unserem Labor:
Chun Kim
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Durch den Einsatz von Antikörper werden
Verschiedene Zelltypen in einem Organ
Markiert, die Antikörperbindung
Wird durch eine chemische Farbreaktion sichtbar
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Unser Versuch heute: Immunhistochemie
practical course
Mouse genetics
and inflammation
Pasparakis group
Aceton - Fixierung
Blocken unspezifischer Bindungsstellen
Antikörper Bindungsreaktion
Sekundär - Antikörper mit HRP
Chromogen (DAB)
Viel Spaß beim Färben !
Vielen Dank an Elza Mahlberg für die Herstellung der Schnitte.
Vielen Dank an Edeltraud Stade und Bianca Kühnel für die Testfärbung und die
Bereitstellung der Reagenzien.